Méthode de Biuret

La méthode de Biuret est une méthode chimique de dosage des protéines.

Principe

En milieu alcalin, les protéines qui possèdent au moins 4 liaisons peptidiques forment avec les ions cuivre (Cu2+) un complexe bleu-violet. Un dosage colorimétrique est par conséquent envisageable à 540 nm. Le réactif de coloration utilisé est le réactif de Gornall ; il est composé :

• de sulfate de cuivre, qui donne la coloration bleu du réactif due aux ions cuivre ;

• d'hydroxyde de sodium, qui rend le milieu basique ;

• de tartrate double de sodium et de potassium, qui «chelate» (piège) l'ions Cu2+ et évite leur précipitation en milieu basique sous forme d'hydroxyde de cuivre Cu (OH) 2 insoluble ;

• d'iodure de potassium, pour éviter la réduction du cuivre.

Un temps de réaction d'environ 30 minutes à l'obscurité est indispensable à l'obtention d'une coloration stable. La lecture étant spectrophotométrique, il faut cependant réaliser une gamme d'étalonnage mais aussi des témoins de compensations adaptés.

Intérêts

• Cette méthode permet d'obtenir un dosage rapide des protéines. Au contraire de la méthode de Kjeldahl (qui reste une méthode de référence légale), les protéines sont dosées sans minéralisation. La technique est par conséquent plus facile à mettre en place et aussi moins onéreuse.

• Le dosage des protéines est envisagé dans le lait, la quantité de protéines est une des qualités servant à fixer le prix d'achat au producteur.

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