Dosage du glucose par le DNS

Le dosage du glucose par le DNS est un dosage colorimétrique du glucose.


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Technique de laboratoire - Colorimétrie - Chimie analytique - Réaction chimique - Chimie générale

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  • ... I/Préparation de la gamme d'étalonnage On réalise une solution de glucose à 2 g/ L avec 0, 2 g de glucose dans un volume de 100 mL. (source : stlbgb.apinc)

Le dosage du glucose par le DNS est un dosage colorimétrique du glucose.

Principe

On utilise les propriétés réductrices du glucose. À chaud et en milieu alcalin, il y a réduction de l'acide 3, 5-dinitrosalycilique : DNS (acide 2-hydroxy-3, 5-dinitrobenzoïque) qui joue le rôle d'oxydant, le glucose étant le réducteur.

Réduction dns.png

Glc \longrightarrow produits \, d'oxydation + neˆ{-}.

L'acide 3-amino-5-nitrosalicylique est un composé rouge. Cette réaction n'est pas stœchiométrique : il n'y a pas de bilan d'oxydo-réduction. L'intensité de la coloration rouge est proportionnelle à la concentration de l'ose si on opère dans des conditions physico-chimiques constantes. Les droites d'étalonnage ne passent pas forcément par l'origine.

Cette méthode n'est pas applicable au dosage d'un mélange complexe de glucides réducteurs.

Protocole

Matériel

Solutions

Étapes

Préparation de la gamme d'étalonnage

Dans une série de tubes :

Lire les absorbances à 540 nm contre le blanc (tube no 0).

Essais

Ils sont à traiter dans les mêmes conditions opératoires.
Réaliser le dosage avec des prises d'essais de 0, 5 mL diluées convenablement, additionnées d'1 mL d'eau distilée et d'1 mL de DNS.

Tableau colorimétrique (résultats expérimentaux)
N° de tube 0 1 2 3 4 5
Solution étalon de glucose à 0, 005 mol/L en mL 0 0, 2 0, 4 0, 6 0, 9 1, 2
Eau distillée en mL (avant chauffage) 1, 5 1, 3 1, 1 0, 9 0, 6 0, 3
DNS en mL 1, 0 1, 0 1, 0 1, 0 1, 0 1, 0
Eau distillée en mL (après chauffage) 7, 5 7, 5 7, 5 7, 5 7, 5 7, 5
Quantité de glucose en µmol 0 1, 0 2, 0 3, 0 4, 5 6, 0

Ce tableau représente ce qui doit être mis dans chaque tube et en quelle quantité.

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La version présentée ici à été extraite depuis cette source le 30/11/2010.
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